汇百试剂蛋白酶K产品性质与注意事项

产品描述:
Proteinase K（蛋白酶K）是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶，其相对分子量约为29.3 kDa，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。Proteinase K应用广泛，可用于制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶等实验，而变性剂如SDS（1%）可提高其活性，常用工作浓度为50-100 µg/mL，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。
 
产品性质：
1）本品来源于基因重组酵母菌株；
2）纯度（Native PAGE电泳检测）：≥95%；
3）比活性值（Specific activity）：≥30 U/mg蛋白；
4）不含RNase和DNase；
5）在尿素和SDS中活性稳定存在；
6）在较广的pH范围内（pH 4.0 – 12.0）均有活性，最佳pH范围为pH 7.5 - 9.0；
7）反应条件：反应缓冲液中37℃ - 70℃温育1 h。推荐反应温度选择70℃；
8）活力单位定义：在37℃，pH 7.5的条件下，每分钟释放1 µM酪氨酸所需要的Proteinase K量定义为1个活性单位；
9）失活方法：反应体系中加入PMSF或DFP抑制剂即可失活，65℃温育10-15 min可部分失活。
 
运输和保存方法：
冰袋运输。4℃干燥保存，有效期3年。更长期保存，可置于-20℃冷冻保存。
使用方法
1. 20-40 mg/mL Proteinase K储存液的配制
1）将干粉溶解于稀释缓冲液中，配制成40-80 mg/mL原液；
【注】：稀释缓冲液配方：20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2。
2）使用低蛋白吸附的0.22 µm滤器过滤除菌；
3）加入等体积无菌甘油，配制成含50%甘油的Proteinase K储存液。
【注】：Proteinase K储存液4℃保存1年。若需反复使用，需分装保存。

2. 按照核酸提取说明书添加指定量Proteinase K储存液即可。

 
注意事项：
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）启用后如需反复使用，需置于-20℃～-80℃冰箱冷冻或者配制成溶液后过滤除菌分装保存。
3）本产品仅作科研用途！
 
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