细胞组织裂解液配方

RIPA裂解液：
RIPA裂解液（英语：Radioimmunoprecipitation assay buffer，全称放射免疫沉淀法缓冲液）是一种用于裂解细胞或组织的裂解缓冲液，常用于放射性免疫沉淀分析（RIPA）。此缓冲液的变性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解缓冲液更强，因为它包含离子型去垢剂SDS和脱氧胆酸钠作为破坏核膜，提取核内物质的活性成分。RIPA缓冲液在实验时能提供低的背景，但也会使激酶变性。
RIPA主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
裂解缓冲液:
50mM Tris-HCl pH7.6 或20mM Hepes pH7.4150-300mM NaCl
1%(w/w)NP-40 (0.5%Triton-X100)5mM EDTA(现加1ml加10ul)临用前加入蛋白酶抑制剂: Na3VO4
钒酸钠1mM(75mM-13.3ul/ml)(用0.2mol/L储存液配制)
PMSF苯甲酰氟1mM(10mg/mlPMSF用量:10ul/ml)或10-20ug/ml Soybean Trypsin inhibitor(加10-20ul) Aprotinin 抑肽酶10ug/ml(10ul/ml)
(Leupeptin 亮肽素10ug/ml未加)Western blotting
给你介绍一个裂解液:
50mMTris-HCl(PH8.0)缓冲液，含: NaCl150mM叠氮钠 0.02% SDS 0.1% NP-40 1%
PMSF 100ug/ml(使用前临时加入)(10mg/mlPMSF用量:10ul/ml)尽量用少的裂解液裂解细胞，取上清电泳，最好用6xSDS 上样buffer。
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