酶底物知多少？

酶反应常用的底物 ，快来跟着汇百试剂了解一下吧！
1.HRP的底物
（1）邻苯二胺（OPD）：是HRP最为敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。OPD应用液稳定性差，易变色，需新配制后在1小时内使用，显色反应过程需避光，而且具有致癌性。
（2）四甲基联苯胺（TMB）：TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长450nm。TMB稳定性好，成色无需避光，无致突变作用，是目前ELISA中应用最广泛的底物。缺点是水溶性差。
（3）其他：5-氨基水杨酸（5-ASA）和2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）。
2.AP的底物
常用对-硝基苯磷酸酯（p-NPP），p-NPP经AP作用后的产物为黄色对硝基酚，最大吸收峰波长为405nm。
3.β-半乳糖苷酶（β-Gal）的底物
常用4-甲基伞酮基-R-D半乳糖苷（4-MUU），酶作用后，生成高强度荧光物4-甲基伞形酮（4-MU），其敏度性较HRP高30～50倍，但测量时需用荧光计。 

如何选择酶底物？
多颜色的酶底物选择与检测系统和应用中的酶相匹配的底物时，需考虑以下几个因素：
● 灵敏度：不同底物灵敏度也不同，有些酶底物随着孵育时间延长，其灵敏度也会增加。
● 颜 色：在多种抗原标记实验应用中，如色素沉着组织（黑色素瘤）和复染组织，颜色对比至关重要。在底物效果相同时，可根据个人喜好选择颜色。
● 观察效果：包括明场、荧光、暗场、电子显微镜和光谱成像等。
● 耐热性：对于IHC/ISH双标实验，首先根据IHC实验检测步骤，选择耐热底物，然后进行热变性以及ISH检测。在需要进行热诱导表位修复(HIER)的多重抗原标记试验中，应首选耐热性底物。

酶底物试剂原料：